Säulenchromatographie (SC / LC)

Synonyme

• Flüssigkeitschromatographie
• Liquid chromatography

Definition

• Klassisches chromatographisches Verfahren. Trennstrecke ist eine mit einer stationären Phase gefüllte Säule durch die die Probe vom Fließmittel gespült und dabei in ihre einzelnen Bestandteile aufgetrennt wird.

Anwendung

• Vor allem für präparative Trennungen, weniger direkt als analytisches Verfahren. So z.B. zur Reinigung organischer Lösemittel und zur Isolierung von Substanzen aus organischem Material.

Säule

• Verwendet werden meist Glassäulen mit Längen von 20 - 150 cm, die Innendurchmesser betragen in der Regel mehr als 1 cm.

Säulenfüllung

• Vor allem Kieselgel mit Korngrößen zwischen ca. 50 µm und 200 µm, daher im Vergleich zur HPLC nur relativ geringe Trennleistung.
• Weitere mögliche Füllmaterialien sind:
  • Aluminiumoxid
  • Ionenaustauscher
  • Molekularsiebe
  • Dextrane
  • Aktivkohle

Mobile Phase

• Der Fluss der mobilen Phase erfolgt allein durch durch die Schwerkraft oder unter geringem Überdruck bis maximal 5 bar, woraus relativ lange Retentionszeiten entstehen.

Trennbare Substanzmenge

• 50 - 100 mg

Detektor

• Es sind die gleichen Detektoren wie in der HPLC einsetzbar, so:
  • UV-Vis-Detektor
  • Differential-Refraktometer
  • Fluorimeter
  • IR-Spektralphotometer
  • Kapazitätsdetektor
  • Radioaktivitätsdetektor
  • Massenspektrometer
  • Photoionisationsdetektor
  • Elektroneneinfangdetektor
  • AAS
  • Konduktometer
  • Polarograph

Probleme

• Ist der Fluss des der Probe durch die stationäre Phase zu langsam, so kommt es zur Verbreiterung und Abflachung der erhaltenen Peaks. Die Symmetrie der Peaks wird ebenfalls verschlechtert.
• Zur Verbesserung der Geschwindigkeit der Probe in der stationären Phase kann mit einer Gradientenelution gearbeitet werden.

• Siehe auch:
  • Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie